埃澤思細(xì)胞凍存液是細(xì)胞保存的主要方法之一，利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

　　

　　細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷，從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。

　　

　　細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲稀釋?zhuān)♂尯蟮募?xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜，這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋以后，該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷。

　　

　　細(xì)胞凍存液主要由FBS、DMSO等組成，是非常經(jīng)典的一種無(wú)菌凍存液。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存。

　　

　　埃澤思細(xì)胞凍存液操作步驟：

　　

　　1、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚起，顯微鏡觀(guān)察其外觀(guān)、形態(tài)、有無(wú)污染等，取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。如為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，用胰蛋白酶消化并用*培養(yǎng)基終止消化，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；如為懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

　　

　　2、加入適量的通用細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到ml，置于凍存管中，密封，不要擰的太緊，避免彎曲變形。

　　

　　3、一般進(jìn)行凍存。亦可采用-20℃30min，-70℃過(guò)夜，后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。

　　

　　埃澤思細(xì)胞凍存液注意事項(xiàng)：

　　

　　1、注意在超凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作，盡量避免污染。

　　

　　2、初次使用融化后可在4℃保存1個(gè)月，單應(yīng)減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。

　　

　　3、雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇，檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。

　　

　　4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。