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液相色譜儀驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間: 2022-04-17  點(diǎn)擊次數(shù): 1622次 更新時(shí)間:2022-04-17

液相色譜儀驗(yàn)證

1.液相色譜儀介紹

液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,然后分析鑒定物質(zhì)成分及含量的儀器。高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。由于HPLC具有高分辨率、 高觀靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易先收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用的生物化學(xué),食品分析,醫(yī)藥研究,環(huán)境分析,無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。


2.液相色譜儀的原理

液相色譜儀由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。


3.為什么液相色譜儀要做驗(yàn)證呢?

這是為了保證液相色譜儀分析檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,所以必須對(duì)所用到的組成系統(tǒng)各部分進(jìn)行驗(yàn)證,以證明該系統(tǒng)符合檢測的目的和要求,這就是儀器驗(yàn)證。從本質(zhì)上講,儀器驗(yàn)證就是根據(jù)檢測物質(zhì)的要求,預(yù)先對(duì)儀器設(shè)置一定的參數(shù)范圍及合適的檢測器,并通過設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來驗(yàn)證該儀器是否符合檢測項(xiàng)目的要求。儀器驗(yàn)證是保證整個(gè)試驗(yàn)是否能成功的先決條件,只有經(jīng)過驗(yàn)證的儀器,確保該儀器各部分都在良好的情況下才能用于物質(zhì)成分的分析檢測,這樣使檢測結(jié)果更準(zhǔn)確,盡可能減小誤差。


4.液相色譜儀的驗(yàn)證項(xiàng)目

(1)安裝確認(rèn)

a. 文件確認(rèn)

b. 附件確認(rèn)

c. 安裝環(huán)境確認(rèn)

d. 安裝情況確認(rèn)

(2)運(yùn)行功能確認(rèn)

a. 運(yùn)行功能確認(rèn)

b. 軟件控制功能測試

c. 流速設(shè)定誤差測試

d. 流速重復(fù)性測試

e. 柱溫設(shè)定誤差測試

f. 柱溫穩(wěn)定性測試

(3)性能確認(rèn)

a. 基線噪聲測試

b. 基線漂移測試

c. 檢測限測試

d. 重復(fù)性測試


5.液相色譜儀使用的注意事項(xiàng)如下

(1)流動(dòng)相均需色譜純度,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細(xì)的膜過濾)。 

(2)流動(dòng)相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用,脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。

(3)不能用純乙腈作為流動(dòng)相,這樣會(huì)使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。

(4)長時(shí)間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機(jī)相(如,甲醇等),因?yàn)?,純水易長霉。

(5)更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊靖洗,然后插入新的流動(dòng)相中。更換無互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過渡一下。

 


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華譜&澤恒是專注于為生物制藥行業(yè)提供實(shí)驗(yàn)室儀器計(jì)量校準(zhǔn)、GMP驗(yàn)證服務(wù)/3Q驗(yàn)證/設(shè)備確認(rèn)/廠房驗(yàn)證的專業(yè)服務(wù)商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程/驗(yàn)證等事業(yè)部的質(zhì)控外包服務(wù)。

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